Kebutuhan tumbuh mikroba: oksigen, pH, suhu kardinal, aktivitas air dan tekanan osmotik, nutrien dan media, dan artinya bagi penyimpanan, linen basah, tangki, dan peralatan

Pengering laundry sebuah rumah sakit rusak pada Jumat sore, dan sekitar 300 kg linen hasil peras menunggu di troli tertutup sampai Sabtu siang di ruang bersuhu 31 °C (angka latihan). Penyelia mengusulkan dua jalan pintas: memindahkan sebagian troli ke ruang pendingin dapur yang kosong, dan menyemprot linen dengan pewangi berdisinfektan supaya "kumannya tidak tumbuh". Jawabannya ada pada kebutuhan tumbuh mikroba. Linen basah menyediakan air hampir penuh, suhu ruang tropis berada di rentang optimum bakteri dari tubuh manusia, pH linen yang sudah dibilas mendekati netral, dan bagian dalam tumpukan miskin oksigen (penalaran editorial). Ruang pendingin tidak menghentikan bakteri yang tahan dingin, dan membawa linen ke ruang pangan membuka jalur pencemaran baru. Bab ini mengukur rentang setiap faktor, lalu menerapkannya pada penyimpanan, linen basah, tangki, dan peralatan.

Batas pembahasan

Bab ini membahas faktor lingkungan yang menentukan apakah mikroba dapat tumbuh, secara kuantitatif: oksigen, pH, suhu, aktivitas air dan tekanan osmotik, nutrien dan cahaya, dan media biakan. Model pembelahan dan fase pertumbuhan ada di Bab 1; aktivitas air dan kelembapan relatif untuk kapang di Bab 9; suhu pangan dan zona suhu berbahaya di Bab 7; kelompok dan genus bakteri di Bab 14; cara menghitung koloni di Bab 15; dan metabolisme serta gas di Bab 17. Sumber utamanya OpenStax Microbiology, ditambah lembar fakta WHO tentang legionelosis dan daftar periksa dapur di Drive pemilik. Status setiap klaim ada di peta sumber. Bab ini tidak memberi wewenang menetapkan kelayakan pangan, linen, atau air.

Titik kardinal dan jendela tumbuh

OpenStax mendefinisikan tiga titik untuk setiap faktor. Untuk suhu, suhu optimum memberi laju tumbuh tertinggi, suhu minimum adalah suhu terendah tempat organisme masih bertahan dan membelah, dan suhu maksimum adalah suhu tertinggi tempat pertumbuhan masih terjadi. Suhu kardinal (cardinal temperatures) adalah sebutan bagi tiga suhu yang mencirikan pertumbuhan satu mikroba, yaitu suhu minimum, optimum, dan maksimum (istilah literatur umum). Pasangan yang sama berlaku untuk pH dan oksigen. Rentang dalam OpenStax hanya perkiraan dan dapat bergeser menurut faktor lingkungan lain.

Menurut OpenStax, kurva laju tumbuh terhadap suhu miring ke arah optimum, diduga karena protein cepat rusak ketika suhu melewati optimum; beberapa derajat di atas optimum karena itu menurunkan laju lebih tajam daripada beberapa derajat di bawahnya (penalaran editorial).

Penalaran editorial bab ini memakai gagasan jendela tumbuh: satu mikroba hanya tumbuh bila semua faktor berada di dalam rentangnya sekaligus,

$$T_{\min} \le T \le T_{\max}, \quad \mathrm{pH}_{\min} \le \mathrm{pH} \le \mathrm{pH}_{\max}, \quad a_w \ge a_{w,\min}$$

dengan $T$ suhu (°C), $\mathrm{pH}$ keasaman, dan $a_w$ aktivitas air (tanpa satuan), ditambah syarat oksigen menurut golongannya. Cukup satu faktor di luar jendela untuk menghentikan pertumbuhan organisme itu, tetapi menghentikan pertumbuhan belum tentu membunuh. Vibrio cholerae, misalnya, tumbuh paling baik pada pH 8,0 tetapi bertahan pada pH 11,0.

Oksigen

Kebutuhan oksigen tampak di tabung tioglikolat, medium yang hampir bebas oksigen dan menerima oksigen yang perlahan berdifusi dari permukaan. Aerob obligat (obligate aerobe) adalah mikroorganisme yang tidak dapat tumbuh tanpa pasokan oksigen yang cukup. Anaerob obligat (obligate anaerobe) adalah mikroorganisme yang dibunuh oksigen. Anaerob fakultatif (facultative anaerobe) adalah mikroorganisme yang tumbuh lebih baik dengan oksigen tetapi juga tumbuh tanpa oksigen melalui fermentasi atau respirasi anaerob. Anaerob aerotoleran (aerotolerant anaerobe) adalah mikroorganisme yang tidak memakai oksigen tetapi tidak dirugikan olehnya. Mikroaerofil (microaerophile) adalah bakteri yang memerlukan oksigen pada kadar rendah, sekitar 1 sampai 10 persen, jauh di bawah 21 persen di udara.

Spesies oksigen reaktif (reactive oxygen species, ROS) adalah ion dan molekul tidak stabil hasil reduksi sebagian oksigen yang dapat merusak hampir setiap makromolekul. OpenStax menyebut hidrogen peroksida dan ion hipoklorit, bahan aktif pemutih, sebagai contohnya. Tiga enzim mengurainya: superoksida dismutase (SOD), peroksidase, dan katalase, yang menjalankan reaksi

$$2\,\mathrm{H_2O_2} \rightarrow 2\,\mathrm{H_2O} + \mathrm{O_2}$$

Sebaran enzim itu menurut golongan tercantum di tabel. Disinfektan oksidator di Bab 4 bekerja dengan jenis kerusakan yang sama, dan bakteri penghasil katalase dapat bertahan pada hidrogen peroksida kadar rendah seperti di Bab 13.

Lingkungan tanpa oksigen ada di rawa, saluran limbah, dan usus. OpenStax mencatat bahwa pada infeksi campuran, anaerob fakultatif menghabiskan oksigen sehingga anaerob obligat dapat tumbuh, dan endospora membuat Clostridium bertahan di udara. Penalaran editorial: hal yang sama terjadi di dasar biofilm, endapan tangki, perangkap lemak, dan tumpukan linen basah; gas yang dihasilkan dan bahaya ruang terbatasnya dibahas di Bab 17.

pH

Keasaman diukur sebagai

$$\mathrm{pH} = -\log_{10} [\mathrm{H^+}]$$

dengan $[\mathrm{H^+}]$ kadar ion hidrogen dalam mol/L, sehingga selisih satu satuan pH berarti kadar sepuluh kali (pengetahuan umum). Menurut OpenStax, komponen sel yang paling peka pH adalah protein, dan pH ekstrem merusak semua makromolekul. Rentang golongannya menurut OpenStax:

Neutrofil (neutrophile) adalah mikroorganisme yang tumbuh optimal pada pH dalam satu atau dua satuan dari pH netral 7. Bagi dapur, pH optimum Salmonella 7,0 sampai 7,5, tetapi pH minimumnya mendekati 4,2 (Contoh 2). Jamur menyukai pH agak asam, 5,0 sampai 6,0, dan bakteri asam laktat pada yogurt dan acar berkembang pada pH sekitar 4,0. Pangan asam bertahan lama karena kebanyakan mikroba pembusuk tumbuh paling baik pada pH mendekati netral dan kurang tahan asam.

Lingkungan mikro dapat berbeda dari sekitarnya: Helicobacter pylori, sebuah neutrofil, bertahan di lambung dengan memecah urea menjadi amonium yang menaikkan pH di dekatnya. Karena itu pH air bilasan belum tentu sama dengan pH di dalam lapisan kotoran atau biofilm (penalaran editorial). Larutan basa membantu melepas kotoran, tetapi V. cholerae yang bertahan pada pH 11,0 menunjukkan bahwa kebasaan saja bukan disinfeksi (Contoh 3). Pengaruh pH pada klorin dibahas di Bab 4.

Suhu

OpenStax membagi mikroba menurut rentang suhu tumbuh:

Psikrotrof (psychrotroph) adalah mikroorganisme yang lebih menyukai lingkungan sejuk, dari sekitar 4 °C suhu lemari pendingin sampai sekitar 25 °C, dan bertanggung jawab atas pembusukan pangan dingin. Mesofil (mesophile) adalah mikroorganisme yang beradaptasi pada suhu sedang dengan suhu optimum dari sekitar 20 °C sampai sekitar 45 °C. Suhu tubuh manusia 37 °C berada di dalam rentang mesofil, dan suhu ruang tropis yang sering 30 °C atau lebih, seperti dicatat Bab 7, juga berada di dalamnya.

OpenStax menggolongkan Listeria monocytogenes, yang berbiak pada 4 sampai 10 °C, sebagai psikrofil. Karena bakteri itu juga tumbuh di tubuh manusia, sifatnya lebih cocok dengan definisi psikrotrof di subbab yang sama (penalaran editorial; lihat peta sumber).

Dingin memperlambat, tidak membunuh. Menurut OpenStax, lemari pendingin pada 0 sampai 7 °C memperlambat pertumbuhan secara nyata, kecuali bagi mikroba yang menyukai dingin; pembekuan di bawah −2 °C dapat menghentikan pertumbuhan dan membunuh sebagian organisme, tetapi pertumbuhan berlanjut setelah pangan dicairkan, dan biakan bakteri justru disimpan beku pada −70 °C atau lebih rendah. Daftar periksa dapur di Drive pemilik memakai 0 sampai 4 °C untuk lemari pendingin dan −18 °C atau lebih rendah untuk pembeku.

Panas merusak protein dan asam nukleat; sterilisasi dan pasteurisasi dibahas di Bab 22, dan enzim tahan panas dari termofil untuk deterjen air panas berkaitan dengan enzim pencucian di Bab 7 · Laundry. Untuk air gedung, lembar fakta WHO menyebut Legionella hidup dan tumbuh di sistem air pada 20 sampai 50 °C dengan optimum 35 °C, dan menyarankan air panas di atas 50 °C, air dingin di bawah 25 °C dan sebaiknya di bawah 20 °C, serta pembilasan mingguan keran yang jarang dipakai. Bab 13 · Bangunan & Fasilitas tentang air panas memakai rentang 20 sampai 45 °C dari narasi bangunan; kedua sumber menempatkan suhu ruang Indonesia di dalam rentang tumbuh (Contoh 5).

Aktivitas air dan tekanan osmotik

Aktivitas air (water activity) adalah perbandingan tekanan uap air suatu bahan terhadap tekanan uap air suling murni pada suhu yang sama. Dalam rumus,

$$a_w = \frac{p}{p_0}$$

dengan $p$ tekanan uap air di atas bahan (kPa) dan $p_0$ tekanan uap air murni pada suhu yang sama (kPa). Air murni bernilai 1,0. Bakteri memerlukan $a_w$ tinggi, 0,97 sampai 0,99, sedangkan jamur tahan keadaan lebih kering; hubungan $a_w$ dengan kelembapan relatif untuk kapang dibahas di Bab 9. Pengeringan mengendalikan pertumbuhan, tetapi mungkin tidak membunuh semua mikroba atau endosporanya.

Tekanan osmotik (osmotic pressure) adalah tekanan yang timbul karena perbedaan kadar zat terlarut di kedua sisi membran semipermeabel. Dalam larutan pekat garam atau gula, air keluar dari sel, membran plasma mengerut menjauhi dinding sel (plasmolisis), dan sel dapat mati; itulah dasar pengawetan dengan air garam dan penggaraman. Madu berisi 80 persen sukrosa dan hanya sedikit mikroba yang mampu tumbuh di dalamnya, tetapi kapang dan khamir lebih tahan kekeringan dan tekanan osmotik tinggi sehingga masih dapat mencemari selai dan bahan bergula. Mikroba seperti itu sering disebut osmotoleran (istilah literatur umum).

Halofil (halophile) adalah mikroorganisme yang memerlukan kadar garam tinggi untuk tumbuh. Menurut OpenStax, halofil laut hidup pada kadar garam sekitar 3,5 persen; halofil ekstrem hidup di Great Salt Lake, yang 3,5 sampai 8 kali lebih asin daripada laut, dan di Laut Mati, yang 10 kali lebih asin; protein Halobacterium kehilangan aktivitas di bawah 1 sampai 2 M garam (Contoh 6 dan 7). Halotoleran (halotolerant) adalah sifat mikroorganisme yang tidak memerlukan garam tinggi tetapi tetap bertahan dan membelah di dalamnya. Stafilokokus, mikrokokus, dan korinebakteri di kulit bersifat halotoleran, dan S. aureus, Bacillus cereus, dan V. cholerae yang halotoleran menghasilkan enterotoksin dan menjadi penyebab utama keracunan makanan. S. aureus tumbuh pada agar manitol garam yang berisi 7,5 persen NaCl, dan Listeria tahan sampai 10 persen NaCl. Pangan asin tidak otomatis aman dari bakteri tahan garam.

Nutrien, faktor tumbuh, dan cahaya

Kebutuhan karbon, nitrogen, dan unsur lain diuraikan di Bab 1. Ada dua tambahan. Pertama, sebagian bakteri sangat pemilih: organisme fastidius tidak dapat membuat nutrien tertentu sehingga nutrien itu harus ditambahkan ke medium, misalnya Haemophilus influenzae yang memerlukan hemin dan NAD. Kedua, sebagian bakteri justru hidup dengan nutrien sangat sedikit. OpenStax menyebut sebagian Alphaproteobacteria sebagai oligotrof yang mampu hidup di lingkungan miskin nutrien, dan mencatat bahwa hampir setiap permukaan dalam cairan yang bernutrien sedikit pun akhirnya ditumbuhi biofilm. Penalaran editorial: air bersih di tangki dan pipa tetap cukup untuk biofilm, sehingga pengendaliannya bertumpu pada aliran, suhu, dan pembersihan seperti di Bab 5.

Cahaya diperlukan bakteri fotosintetik. Menurut OpenStax, fotoautotrof seperti sianobakteri memakai cahaya pada panjang gelombang 400 sampai 700 nm, dan ledakan sianobakteri di air tawar menghasilkan mikrosistin yang dapat merusak hati bila terminum; pupuk nitrogen dan fosfor yang terbawa ke air memicu ledakan alga. Penalaran editorial: tangki yang terbuka atau tembus cahaya memberi cahaya dan nutrien bagi alga dan sianobakteri, sehingga tutup rapat dan kedap cahaya termasuk pengendalian.

Media biakan

Media selektif (selective media) adalah media yang menghambat mikroorganisme yang tidak diinginkan dan mendukung organisme sasaran. Media diferensial (differential media) adalah media yang membedakan koloni berbagai bakteri melalui perubahan warna koloni atau medium. Contoh dari OpenStax:

Studi kasus OpenStax menunjukkan pemakaiannya: setelah piknik, salad ayam berisi kokus Gram positif bergerombol yang katalase positif dan menguningkan agar manitol garam, sehingga S. aureus dipastikan; bakteri itu diduga masuk dari penjamah makanan dan berbiak ketika salad dibiarkan hangat selama pidato berjam-jam. Penyakitnya dibahas di Bab 20.

Penalaran editorial: hasil "tidak tumbuh" hanya berarti tidak tumbuh pada medium, suhu, atmosfer, dan waktu inkubasi yang dipilih, seperti prinsip membaca hasil di Bab 1. Cara menghitung koloni dibahas di Bab 15.

Artinya bagi penyimpanan, linen basah, tangki, dan peralatan

Tabel berikut adalah penalaran editorial dari fakta di bab ini:

Pada kasus pembuka, linen tidak dipindahkan ke ruang pendingin pangan; beban dialihkan ke pengering lain atau laundry cadangan, dan bila waktu tunggu melewati batas prosedur, penyelia memutuskan pencucian ulang seperti di Bab 14 · Laundry dan Bab 19 · Laundry tentang higiene linen dan gejala hasil cucian. Semprotan pewangi tidak mengubah satu pun faktor di jendela tumbuh (Contoh 9).

Contoh kerja

Contoh 1: oksigen bagi mikroaerofil. Pada tekanan udara 101,3 kPa (nilai literatur umum), oksigen 21 persen memberi tekanan parsial $0{,}21 \times 101{,}3 = 21{,}3$ kPa. Kadar 1 sampai 10 persen yang diperlukan Campylobacter setara 1,0 sampai 10,1 kPa, yaitu $21/10 = 2{,}1$ sampai $21/1 = 21$ kali lebih rendah daripada udara.

Contoh 2: pH minimum Salmonella. Pada pH 4,2, $[\mathrm{H^+}] = 10^{-4{,}2} = 6{,}3 \times 10^{-5}$ mol/L, dan pada pH 7,0, $10^{-7}$ mol/L. Perbandingannya $10^{2{,}8} = 631$. Acar pada pH 4,0 hanya $10^{0{,}2} = 1{,}58$ kali lebih asam daripada pH 4,2, sehingga pengukuran pH yang teliti menentukan apakah pangan berada di bawah batas itu.

Contoh 3: larutan basa. Air bilasan pertama bersifat pH 11 (angka latihan). Kadar ion hidrogennya $10^{11-7} = 10^{4} = 10.000$ kali lebih rendah daripada air netral, dan pH 11 berada $11 - 10{,}5 = 0{,}5$ satuan di atas batas atas rentang alkalifil. Karena V. cholerae bertahan pada pH 11,0, larutan itu tidak dianggap disinfeksi.

Contoh 4: termometer berskala Fahrenheit. Lemari pendingin impor menunjukkan 45 °F (angka latihan). Dalam Celsius, $(45 - 32) \times 5/9 = 7{,}2$ °C: di atas 0 sampai 4 °C pada daftar periksa dan di dalam 4 sampai 10 °C tempat Listeria berbiak. Sumber pun perlu diperiksa: OpenStax menulis 340 °C (700 °F), padahal $340 \times 9/5 + 32 = 644$ °F.

Contoh 5: suhu air di titik pakai. Dua belas titik air sebuah rumah sakit terukur 60, 58, 55, 52, 49, dan 44 °C pada pipa panas, dan 31, 29, 27, 24, 19, dan 16 °C pada pipa dingin (angka latihan). Sebanyak $6/12 = 50$ persen titik berada di 20 sampai 50 °C, dan menurut saran WHO 2 titik panas di bawah 50 °C serta 3 titik dingin di atas 25 °C tidak memenuhi, yaitu $5/12 = 41{,}7$ persen.

Contoh 6: air garam dapur. Air garam 10 persen (berat per volume) untuk 20 L memerlukan $20 \times 100 = 2.000$ g garam. Larutan itu tidak menghentikan Listeria, yang tahan sampai 10 persen NaCl. Sebagai perbandingan, laut 3,5 persen, Great Salt Lake $3{,}5 \times 3{,}5 = 12{,}25$ sampai $3{,}5 \times 8 = 28$ persen, dan Laut Mati $3{,}5 \times 10 = 35$ persen.

Contoh 7: kebutuhan garam halofil ekstrem. Dengan massa molar NaCl 58,44 g/mol (nilai literatur umum), 1 M setara $58{,}44$ g/L atau 5,8 persen, dan 2 M setara 116,9 g/L atau 11,7 persen. Air laut 35 g/L setara $35/58{,}44 = 0{,}60$ M, sehingga Halobacterium memerlukan $1/0{,}60 = 1{,}7$ sampai $2/0{,}60 = 3{,}3$ kali kadar garam laut.

Contoh 8: menghitung aktivitas air. Tekanan uap air murni pada 30 °C sekitar 4,246 kPa (nilai literatur umum). Bahan dengan tekanan uap 4,08 kPa (angka latihan) mempunyai $a_w = 4{,}08/4{,}246 = 0{,}961$, di bawah 0,97 untuk bakteri. Batas 0,97 setara $0{,}97 \times 4{,}246 = 4{,}12$ kPa.

Contoh 9: waktu tunggu linen basah. Pada kasus pembuka, keempat faktor berada di jendela tumbuh mesofil. Dengan model Bab 1 dan waktu generasi 40 menit (angka latihan), menunggu 8 jam memberi $480/40 = 12$ generasi atau $2^{12} = 4.096$ kali, sedangkan dikeringkan dalam 2 jam memberi $2^{3} = 8$ kali. Selisihnya $4.096/8 = 512$ kali; waktulah faktor yang dapat dikendalikan, bukan semprotan.

Kondisi berhenti

Hentikan pekerjaan dan serahkan keputusan kepada penanggung jawab keamanan pangan, penyelia laundry, tim pencegahan infeksi, atau pengelola bila:

1. Suhu lemari pendingin di luar batas untuk waktu yang tidak diketahui; kelayakan bahan dinilai penanggung jawab keamanan pangan.
2. Ada usulan menyimpan linen, sampah, atau barang nonpangan di ruang pendingin pangan.
3. Linen basah melewati batas waktu tunggu prosedur atau berbau; keputusan cuci ulang ada pada penyelia laundry.
4. Suhu air panas atau dingin di rumah sakit berada di rentang tumbuh Legionella pada titik pakai; laporkan, dan jangan mengubah setelan pemanas di luar wewenang, karena suhu tinggi dan bahaya melepuh diselesaikan bersama seperti di Bab 13 · Bangunan & Fasilitas.
5. Resep pengawetan dengan garam, gula, atau asam akan diubah tanpa validasi.
6. Pekerjaan memerlukan masuk ke perangkap lemak, tangki, atau ruang lain yang mungkin miskin oksigen; ikuti prosedur ruang terbatas di Bab 17.
7. Teknisi diminta membiakkan mikroba atau mengubah media dan inkubasi sendiri.

Salah tafsir yang sering terjadi

1. "Asal di bawah 10 °C, bakteri tidak tumbuh." Psikrotrof tumbuh dari sekitar 4 °C, dan Listeria berbiak pada 4 sampai 10 °C.
2. "Tanpa oksigen tidak ada bakteri yang tumbuh." Anaerob obligat justru dibunuh oksigen, dan anaerob fakultatif tumbuh dengan atau tanpa oksigen.
3. "Larutan yang sangat basa sudah mendisinfeksi." V. cholerae bertahan pada pH 11,0; disinfeksi memerlukan agen, kadar, dan waktu kontak yang benar.
4. "Pangan yang asin pasti aman." S. aureus tumbuh pada 7,5 persen NaCl dan Listeria tahan sampai 10 persen.
5. "Membekukan sama dengan mensterilkan." Pembekuan menghentikan pertumbuhan dan hanya membunuh sebagian organisme; pertumbuhan berlanjut setelah dicairkan.
6. "Tidak tumbuh di media berarti tidak ada bakteri." Media selektif dan kondisi inkubasi menentukan apa yang dapat tumbuh.

Hubungan dengan bab lain

Model pertumbuhan ada di Bab 1, kelompok bakteri di Bab 14, hitungan koloni di Bab 15, dan gas metabolisme di Bab 17. Penerapannya ada di Bab 9 tentang kapang, Bab 7 tentang suhu pangan, Bab 13 · Bangunan & Fasilitas tentang air panas, Bab 5 tentang biofilm, Bab 14 · Laundry tentang higiene linen, Bab 2 tentang ketahanan mikroba, dan Bab 20 tentang patogen pangan.

Latihan dan pembahasan

1. Empat tabung tioglikolat menunjukkan: A tumbuh hanya di permukaan, B hanya di dasar, C pita tipis sedikit di bawah permukaan, dan D merata di seluruh tabung. Golongkan keempatnya.
2. Berapa kali lebih tinggi kadar ion hidrogen pada pH 4,5 dibandingkan pH 6,0?
3. Termometer lemari pendingin menunjukkan 50 °F. Berapa °C, dan apa artinya bagi Listeria?
4. Berapa gram garam untuk 15 L air garam 7,5 persen (berat per volume), dan apakah larutan itu menghambat S. aureus?
5. Mengapa pembekuan pangan atau linen tidak dapat dianggap disinfeksi?
6. Laporan menyebut usap meja "tidak tumbuh pada agar MacConkey". Apa yang dapat dan tidak dapat disimpulkan?

Kunci jawaban beralasan

1. A aerob obligat, B anaerob obligat, C mikroaerofil, dan D anaerob aerotoleran. Pola itu mengikuti kadar oksigen yang tinggi di permukaan tabung dan menurun ke dasar, sedangkan anaerob fakultatif akan lebat di atas dan tetap tumbuh di seluruh tabung.
2. Selisihnya 1,5 satuan pH, sehingga perbandingannya $10^{1{,}5} = 31{,}6$ kali. Satu satuan pH berarti kadar sepuluh kali karena skala pH adalah logaritma.
3. $(50 - 32) \times 5/9 = 10$ °C, batas atas rentang 4 sampai 10 °C tempat Listeria berbiak menurut OpenStax. Lemari itu jauh di atas 0 sampai 4 °C pada daftar periksa, sehingga perlu diperbaiki dan bahan di dalamnya dinilai penanggung jawab keamanan pangan.
4. Diperlukan $15 \times 75 = 1.125$ g garam. Larutan itu tidak menghambat S. aureus, karena bakteri ini tumbuh pada agar manitol garam yang berisi 7,5 persen NaCl.
5. Menurut OpenStax, pembekuan di bawah −2 °C dapat menghentikan pertumbuhan dan hanya membunuh organisme yang peka. Setelah dicairkan pertumbuhan dapat berlanjut, dan biakan bakteri bahkan sengaja disimpan beku, sehingga yang bertahan tetap ada.
6. Hasil itu hanya berarti tidak ada bakteri yang tumbuh pada medium selektif dan kondisi yang dipilih, yang terutama ditujukan bagi Gram negatif seperti enterik. Bakteri Gram positif seperti stafilokokus dan Listeria dihambat medium itu, sehingga meja belum dapat dinyatakan bersih dari bakteri.

Referensi